? ? ? ?近年來隨著高效液相色譜儀的檢測器靈敏度和色譜柱峰容量的提高，可以在極低濃度下進(jìn)行檢測，但鬼峰問題卻成為了人們關(guān)注的焦點(diǎn)。恒譜生今天就跟大家聊聊鬼峰產(chǎn)生原因和解決措施吧!
一、什么是鬼峰：
? ? ? ?如果化合物出現(xiàn)的時(shí)間少于預(yù)期的保留時(shí)間,則稱為鬼峰”。這將顯示為與注入同一色譜圖的化合物具有不同保留時(shí)間的峰。色譜中的鬼峰是在小于預(yù)期保留時(shí)間的間隔內(nèi)出現(xiàn)的不需要的峰。這些峰通常是由其他化合物或代謝物與溶劑和固定相的相互作用引|起的,這會(huì)導(dǎo)致分離度降低，使評(píng)估分離質(zhì)量變得困難。
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二、鬼峰的來源：
? ? ? 鬼峰的來源通常分為三類：目標(biāo)物質(zhì)以外的雜質(zhì)、LC儀器的內(nèi)部污染和流動(dòng)相中的雜質(zhì)。
(1)?儀器中的雜質(zhì)
? ? ? 儀器中產(chǎn)生鬼峰的最常見原因是進(jìn)樣器造成的殘留。當(dāng)將針頭浸入小瓶中吸取樣品時(shí)，樣品中的物質(zhì)會(huì)成為殘留物的來源，因?yàn)樗鼈兛梢晕降结橆^的內(nèi)外表面。那些即使在針頭沖洗后也沒有被去除的物質(zhì)被帶到下一個(gè)分析中，并以鬼峰的形式出現(xiàn)。由于即使在多次空白分析（僅注入流動(dòng)相的分析）后也會(huì)出現(xiàn)表現(xiàn)出特別強(qiáng)吸附的物質(zhì)，因此可能很難將自動(dòng)進(jìn)樣器識(shí)別為鬼峰的來源。
(2)?樣品中的雜質(zhì)
? ? ? 當(dāng)樣品中存在與目標(biāo)化合物吸收波長相同的雜質(zhì)時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生鬼峰。由于來自樣品的鬼峰不會(huì)出現(xiàn)在空白注射中，因此確定來源相對(duì)容易。
(3)?流動(dòng)相中的雜質(zhì)
? ? ?①流動(dòng)相中因長時(shí)間使用而產(chǎn)生有機(jī)物或空氣中的有機(jī)物溶解在流動(dòng)相中
? ? ?②由于長期用新流動(dòng)相補(bǔ)足現(xiàn)有流動(dòng)相而不是每天或?yàn)槊拷M樣品準(zhǔn)備新瓶而導(dǎo)致流動(dòng)相被污染
? ? ?③使用受污染的有機(jī)溶劑和/或水制備流動(dòng)相
? ? ?④使用受污染的流動(dòng)相試劑
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三、出現(xiàn)“鬼峰”怎么辦：
? ? ? ?如果早期峰是由于樣品引起的，那么它實(shí)際上不是鬼峰，而是分析中需要考慮的真實(shí)樣品峰。光散射是表征這些大聚集峰的一個(gè)很好的工具，因?yàn)榧词箾]有可用于確定摩爾質(zhì)量的濃度信號(hào)，仍然可以確定大?。≧MS 半徑）和數(shù)密度。如果樣品中大顆粒的峰滲入其他樣品峰，您可以調(diào)整目標(biāo)樣品峰的基線以排除較大顆粒的貢獻(xiàn)。如果空白注入也能看到鬼峰，那是真正的鬼峰了。
? ? ? ?要消除或防止這些鬼峰：在加載和注入步驟中使用壓力變化最小的 HPLC 系統(tǒng)。請注意，加載期間的壓力僅顯示在前面板上，通常不是 HPLC 數(shù)據(jù)文件中記錄的數(shù)據(jù)的一部分。如果鬼峰或系統(tǒng)峰在多次空白注射中可重現(xiàn)，您可以使用 ASTRA 的基線減法程序從樣品注射中減去空白注射的光散射基線。選擇脫落最少的液相色譜柱。逐漸改變流速（不超過 0.1 mL/min2）以防止大的壓力變化沖擊色譜柱。
? ? ? ?恒譜生的鬼峰捕集去除柱（又稱鬼峰捕集小柱）可以有效吸附流動(dòng)相中的雜質(zhì)，從而縮短了方法驗(yàn)證和雜質(zhì)分析的時(shí)間。鬼峰捕集去除柱主要的特點(diǎn)是能夠去除溶劑包括有機(jī)溶劑中的雜質(zhì)。反相色譜梯度分析時(shí)，將鬼峰捕集小柱安裝在梯度混合器和自動(dòng)進(jìn)樣器之間，不僅能夠去除流動(dòng)相中的雜質(zhì)，還可以有效捕集管路和混合器中的雜質(zhì)。
? ? ? ?今天恒譜生分享的知識(shí)先到這啦，希望對(duì)您的工作有所幫助！
發(fā)布于: 2022-12-30